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技術文章

磁珠分離技術與產品——ReSyn Biosciences

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ReSyn Biosciences生產MagReSyn系列新一代的高分子聚合物微球(微粒)產品,這一平臺是生物醫學領域科研和應用的好幫手。
ReSyn聚合物技術生產高磁性的系列磁性分離、富集產品。MagReSyn分離產品用于蛋白質組學,分子和細胞生物學領域。另外,根據客戶需求生產超高荷載能力的MAX產品,滿足低洗脫體積的需求。
產品包括
1.         NTA
2.         SAX
3.         Tio2
4.         Zro2
5.         Ti-IMAC
6.         HILIC
7.         Amine
8.         Carboxyl
9.         Streptavidin
10.     Protein A
11.     Protein G
12.     Trypsin
13.     Chymotrypsin
詳情如下:
1.       MagReSyn NTA & NTA篩選試劑盒 (MagReSyn NTA & NTA Screening Kit)
用于6x 組氨酸標簽蛋白的快速親和純化
MagReSyn NTA微顆粒具有強金屬螯合能力的氨三乙酸(nitrilotriacetic acid, NTA)殘基。MagReSyn NTA預先與鎳離子螯合,用于親和純化組氨酸蛋白。鑒于不同類型的組氨酸標簽蛋白可能對不同的金屬離子親和性存在差異,ReSyn Biosciences提供系列組氨酸標簽蛋白純化篩選試劑盒(MagReSyn NTA-KIT),產品為與四種不同二價金屬離子(Ni2+, Cu2+, Co2+, Zn2+)螯合的MagReSyn NTA,方便用戶找到針對自身靶蛋白的適純化方案。
2.       MagReSyn SAX
離子交換法快速實現蛋白分級分離(protein fractionation)
MagReSyn SAX強陰離子交換劑通過利用凈電荷差異來逆向吸收與自身電荷相反的分子,用于蛋白/肽,酶,抗體等生物分子的捕獲,純化和回收。這種磁性聚合微粒是血清,血漿,尿液,腦脊液(CSF),細胞裂解液,細胞培養上清液等復雜生物樣品理想的分級分離產品,用在雙向電泳,HPLC和質譜分析前處理中。這種具有荷載能力的微粒能滿足高度的濃縮需求,實現小洗脫體積。
3.       MagReSyn TiO2
TiO2-功能性微粒(TiO2-functional microspheres)用于磷酸肽的高特異性富集
蛋白磷酸化參與多種細胞過程,約30%蛋白可實現磷酸化修飾。很多研究聚焦于蛋白的翻譯后修飾。然而,因磷酸化肽豐度低,化學計量低和理化特性等因素,導致長期以來蛋白質組尺度上的磷酸化研究都是蛋白質組學研究的一個重要挑戰。因此,當前迫切需要能特異富集磷酸化肽、且與質譜分析兼容的富集技術。
MagReSyn TiO2-功能性微粒能在復雜生物樣品的蛋白消化物中高特異,高重復性富集磷酸化肽。二氧化鈦選擇性親和、富集磷酸化的絲氨酸,絲氨酸和酪氨酸。MagReSyn TiO2微粒經工程化處理實現特異性大化,在同類產品中卓爾不群,具有*的磷酸肽回收能力。
MagReSyn TiO2微??梢詥为毷褂靡部膳cMagReSyn ZrO2和/或MagReSyn Ti-IMAC聯合應用,富集不同類型的磷酸肽。
4.       MagReSyn ZrO2
ZrO2-功能性微粒(ZrO2-functional microspheres)用于磷酸肽的高特異性富集
在復雜的蛋白消化產物中實現磷酸化肽的高特異性富集是當前蛋白質組學研究的重要挑戰。當前,有多種具有不同特異性和親和性的磷酸化肽分離技術,這些技術或單獨或聯合,用于磷酸肽的富集、回收中。MagReSyn ZrO2微粒在復雜生物樣品的蛋白消化物中高特異,高重復性實現磷酸化肽的富集。MagReSyn ZrO2微??梢詥为毷褂靡部膳cMagReSyn ZrO2和/或MagReSyn Ti-IMAC聯合應用,富集不同類型的磷酸肽。
5.       MagReSyn Ti-IMAC
螯合了Ti4+金屬離子的磁性微粒,用于高特異性磷酸肽富集
高通量磷酸化蛋白質組學分析要求與質譜兼容的磷酸化肽特異性富集手段。MagReSyn Ti-IMAC微粒具有能與Ti4+螯合的磷酸基團活化的彈性鏈接(減少了空間位阻)。這種性MagReSyn微粒能在復雜生物樣品的蛋白消化物中高特異,高重復性的實現磷酸化肽富集。MagReSyn Ti-IMAC微??梢詥为毷褂靡部膳cMagReSyn ZrO2和/或MagReSyn Ti-IMAC聯合應用,富集不同類型的磷酸肽。
6.       MagReSyn HILIC
多模式(multi-mode) HILIC微粒,用于質譜前樣品的清潔(cleanup)
樣品準備的多種環節可能引入污染,導致質譜結果多變。消化和MS分析前樣品準備(清潔)的方法/工具包括色譜柱,脫鹽柱(膜)和區段用packed tips等魚貫式流程。雖然這些技術廣泛應用,但是他們不能自動化,或不能優化用于平行處理而實現高通量。為了清潔過程的全面自動化,ReSyn Biosciences開發了移除污染用的普適性磁性混合模式HILIC。其自動化清潔流程減少了樣品處理步驟,實現大規模平行樣品制備,贏得了大量客戶。
MagReSyn HILIC用于平行蛋白樣的MS分析前凈化清潔,重現性高,流程全面自動化。這一產品可用于干擾MS分析的各種普通污染的清潔。
7.       MagReSyn Amine
伯胺功能性支持微粒,用于配體吸附或化學修飾
NH2功能性微??赏ㄟ^離子相互作用物理吸附生物分子,或通過化學功能化,利用多種雙功能化學偶聯試劑共價結合生物分子。常用于偶聯的試劑包括戊二醛(glutaraldehyde)和1,4-丁二醇二縮水甘油醚(1,4-butanediol diglycidyl ether)。
8.       MagReSyn羧基(MagReSyn Carboxyl)
通過伯胺殘基共價結合,用于配體的固化
MagReSyn羧基磁性聚合微粒通過碳二亞胺-琥珀酰亞胺酯(carbodiimide-succinimidyl ester)活化和后續酰胺鍵形成來共價固化含伯胺的配體。羧基活化有多種策略,但偶聯蛋白和其它含伯胺的配體常用的方法是在水相中通過EDC (1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimide)活化。這一反應可以通過一步反應或通過兩步反應(添加N-hydroxysuccinimide (NHS)或更穩定的sulfo-NHS生成中間產物NHS酯或sulfo NHS ester)完成。
9.       MagReSyn鏈親合素(MagReSyn Streptavidin)
強大的捕獲生物素化分子的能力
MagReSyn鏈親和素微粒含共價結合的鏈親合素。聚合物的多孔特性具有*的鏈親和素承載能力,使其具有*的固化/結合生物素化生物分子能力。*的鏈親和素承載力使其只需使用10 µl的微粒,提高了實驗微型化能力,更利于高通量自動化分析。MagReSyn鏈親和素微??捎糜诘鞍椎墓袒图兓?、SELEX和焦磷酸測序用核酸捕獲和單鏈DNA模板制備。經固化的生物素化抗體可用于后續的免疫檢測中。
MagReSyn鏈親合素MAX (MagReSyn Streptavidin MAX)
捕獲生物素化分子用具*承載力的鏈親和素磁珠
MagReSyn Streptavidin MAX根據客戶需求訂制,實現生物素分子結合能力的大化。滿足高通量自動化分析微板應用的需求。
10.   MagReSyn Protein A
抗體和免疫沉淀等親和純化用高承載力蛋白A
MagReSyn Protein A微粒共價偶聯的蛋白A能在血清樣品中高特異性、單步純化>95%的IgG。蛋白A為~56 kDa的棒狀金黃色葡萄球菌(bacterium Staphylococcus aureus)細胞壁表面蛋白,廣泛用于IgG抗體的高特異性純化和免疫沉淀中。蛋白A含5個免疫球蛋白結合結構域折疊形成的三螺旋束(three-helix bundle),特異結合IgG抗體的Fc區域。蛋白A特異地、高親和力結合人,兔,小鼠,豚鼠,貓和豬IgG。MagReSyn的高蛋白A承載能力使其能在實驗中結合更多免疫球蛋白,實現實驗的微型化(experimental miniaturization)。
MagReSyn Protein A MAX
*蛋白純化和免疫沉淀能力的蛋白A
MagReSyn Protein A MAX根據客戶需求訂制,實現結合能力的大化。實現實驗微型化,滿足高通量自動化分析微板應用的需求。
11.   MagReSyn Protein G
抗體和免疫沉淀等親和純化用高承載力的蛋白A
MagReSyn Protein G微粒用于從生物樣品中高特異捕獲多種免疫球蛋白。重組的鏈球菌蛋白G(缺少白蛋白結合區,增加了免疫球蛋白特異性)共價連接在磁性微球上,減少了漏出,讓蛋白G更穩定,適合更廣闊的親和純化條件。蛋白G結合多種哺乳動物免疫球蛋白,具有比蛋白A更強的結合能力,包括人IgG3和大鼠IgG2a。不與人IgM, IgD或IgA結合。MagReSyn高的蛋白G承載能力使其能滿足實驗微型化需求,實現對血清樣品中高特異性、單步純化>95%的IgG。
12.   MagReSyn Trypsin
蛋白樣品的質譜分析前制備,實現快速、自動化胰酶消化。
MagReSyn胰酶微粒共價固化了測序級胰酶(TPCK處理阻止胰凝乳蛋白酶活性),用于質譜分析前的蛋白消化。多孔的MagReSyn承載能力強,使其具有高的酶活性,快速實現胰酶消化。這種固化胰酶的性質穩定,能在變性條件下(包括尿素和SDS條件)保持活性,自溶性有限,實現了消化流程的自動化和微型化,提高了消化的重現性。
13.   MagReSyn Chymotrypsin
快速,自動化實現質譜前蛋白樣品的胰凝乳蛋白酶消化
MagReSyn Chymotrypsin微粒由共價固化的測序級胰凝乳蛋白酶(TLCK處理阻止胰酶活性)用于質譜分析前的蛋白消化。多孔MagReSyn具有的高承載能力,消化能力高,實現了快速消化。磁珠固化的胰凝乳蛋白酶能自動化,微型化消化流程,提高實驗重現性。胰凝乳蛋白酶對疏水殘基切割能力強,與MagReSyn Trypsin蛋白消化覆蓋力互補。

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