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ELISA試劑盒顯色溫育反應

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          ELISA試劑盒廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中,有著靈敏度高、特異性強、經濟性較好等優點,下面我們來說說ELISA試劑盒的顯色溫育反應。
  ELISA試劑盒約40分鐘顯色達,隨即逐漸減弱,至2小時后即可完全消退至無色。TMB的終止液有多種,疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉(SDS)等酶抑制劑均可使反應終止。這類終止劑尚能使藍色維持較長時間(12-24小時)不褪,是目視判斷的良好終止劑。此外,各類酸性終止液則會使藍色轉變成黃色,此時可用特定的波長(450nm)測讀吸光值。
  ELISA試劑盒實驗中顯色是ELISA試劑盒中的zui后一步溫育反應,此時酶催化無色的底物生成有色的產物。反應的溫度和時間仍是影響顯色的因素。在一定時間內,陰性孔可保持無色,而陽性孔則隨時間的延長而呈色加強。適當提高溫度有助于加速顯色進行。在定量測定中,ELISA試劑盒加入底物后的反應溫度和時間應按規定力求準確。定性測定的顯色可在室溫進行,時間一般不需要嚴格控制,有時可根據陽性對照孔和陰性對照孔的顯se情況適當縮短或,及時判斷。
  ELISA試劑盒的實驗操作程序簡述:
  1.準備試劑,樣品和標準品;
  2.加入準備好的樣品和標準品,37℃反應30分鐘;
  3.洗板5次,加入酶標試劑,37℃反應30分鐘;
  4.洗板5次,加入顯色液A、B,37℃反應10分鐘;
  5.加入終止液;
  6.15分鐘之內度OD值;
  7.計算。
 
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