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技術文章

如何保證ELISA試劑盒使用的安全性?

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      ELISA試劑盒中抗體有包被抗體和酶標抗體,這兩種抗體是一種抗體,前者沒有酶標,后者用酶進行了標記.NCM-ELISA一般有一抗和二抗,這兩種抗體不一樣,前者(一抗)一般是鼠抗體或兔抗體,沒有酶標,相對應的二抗一般是羊抗鼠或羊抗兔抗體,用酶進行標記.也有用馬大規模備抗體的.TDS-ELISA是三抗體ELISA,第三級的抗體是將信號級聯放大.以上三種是比較常見的,還有其他一些試劑盒,可參考免疫學的內容.
  一、保證ELISA試劑盒安全性的方法:
  1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
  2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
  3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
  二、ELISA試劑盒的操作注意事項:
  1.試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
  2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
  3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
  4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
  5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
  6.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
  三、ELISA試劑盒的樣品收集、處理及保存方法:
  1.血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
  2.血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
  3.細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
  4.組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
  5.保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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