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技術文章

12招教您更好地選擇合適的ELISA試劑盒!

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       ELISA試劑盒由于其試劑穩定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。ELISA檢測試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測。
  ELISA試劑盒的選型技巧:
  1、查找待測樣本的蛋白濃度
  可以通過 NCBI 的文獻,uniprot,pax-dab 上給出的蛋白表達量參考值來比較 ELISA 試劑盒中給出的樣本值與報道值是否一致
  2、試劑盒的應用種屬、檢測樣本的種類
  除試劑盒特別說明外,一般不同種屬不能通用。常見待測樣本種類有:血清和血漿(不同抗凝劑),細胞上清,和細胞裂解液,試劑盒中不同樣本的稀釋液不混用
  3、試劑盒的檢測范圍
  也就是標曲范圍,特別要注意待測樣本濃度是否落在標曲范圍內,對于濃度很高的樣本,可以先進行預實驗摸索到比較好的稀釋倍數后再大量測定樣本
  4、試劑盒中的稀釋線性及回收率
  a. 稀釋線性:一般指樣本稀釋線性,是將樣本梯度稀釋下來,看各稀釋梯度濃度是否成線性;參考樣本稀釋線性可以選擇樣本的較佳稀釋倍數
  b. 稀釋線性也有做加標稀釋線性的情況,加標稀釋線性是將標準品加入樣本中測定加入的標準品濃度測定是否準確;同樣也是確定待測樣本稀釋倍數的參考指標。一般線性和回收率的范圍在 80%-120% 比較合適
  5、試劑盒的其它指標
  a. 靈敏度:試劑盒能夠檢測到的樣本較低濃度的能力,如果待檢指標含量很低,需要選擇高靈敏度的 ELISA 試劑盒
  b. 板間和板內的變異系數(CV%): 反映板內和不同板之間是否均勻,CV% 一般小于 10% 比較好
  6、試劑盒的有效期
  試劑盒的有效期一般是半年至一年,樣本準備時間需要考慮到試劑盒的有效期
  7、試劑盒的特異性
  ELISA 試劑盒的特異性與試劑盒的關鍵組分,抗體對有關。若抗體對中之一為多抗,另一個必須為單抗,建議使用雙單抗
  8、重復性
  科學實驗講求重復性,一般 ELISA 試劑盒,其板內和板間變異系數應該控制在 11% 和 15% 以內
  9、簡便性
  試劑盒在保證高質量數據的情況下,實驗時間越短,操作越便利,越容易受到用戶歡迎。這也不妨作為選擇試劑盒的一個指標
  10、經濟性
  進口分裝試劑盒因為省去不少物流和報關費用,與國外*試劑相比價格上有比較大的優惠,而且能提供比較靈活的包裝規格,特別是 48T 等小包裝,目前很多客戶因為對品牌的信任度問題,主要還是選擇國外*,但是國內進口分裝比較成熟的公司仍然是一個非常好的選擇
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