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哪些因素會影響ELISA試劑盒的試驗?

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  ELISA試劑盒,即酶聯免疫法。ELISA法具有靈敏度高、特異性強、重復性好的特點,并具有操作簡潔、無放射性危害的優點,因此多年來廣泛應用于各高校、醫院、血站和科研機構的試驗室中。
 
  影響ELISA試驗的要素有如下三方面:
 
  一、試劑盒
 
  1、抗原、抗體活性對效價的影響:主要是試劑中抗體(或抗原)的效價下降或失活,成果不易判別。再有ELISA試劑盒靈敏度高,對雜質的反響靈敏度也高,試驗中空白對照OD值偏高或假陽性;
 
  2、酶結合物濃度過高,也會導致OD值假性增高。
 
  二、試驗儀器
 
  1、加樣器是否通過校正,酶免測定血清用血量很少,如手工加樣器的功能不好,吸取樣品不,會使成果忽高忽低;
 
  2、每次洗板前,應查看洗板機針孔有無阻塞。
 
  三、ELISA試劑盒操作
 
  1、檢測前先將試劑盒從冰箱取出置室溫平衡20min后運用,試劑用完及時放回冰箱冷藏,避免形成試驗成果假性下降;
 
  2、加樣時留意勿觸及包被板底部,避免擦傷包被物使抗體(抗原)掉落而影響試驗成果的準確性;
 
  3、洗刷不充分,會使成果假性增高,過分洗刷呈假陰性;
 
  4、比色時應保持包被孔底部無異物、無水汽,特別是冬天板從37℃水浴箱取出時,底部留有水汽,應將板底擦干后進行比色,水汽或孔內氣泡也會使OD值升高;
 
  5、抗原與抗體反響達到完全平衡,依賴于溫度與時刻。溫度高于45℃易引起失活及符號物掉落,溫度低于4℃,影響反響速度。
 
  總歸,由于ELISA試劑盒試驗的影響要素較多,在實踐工作中必須操作規范、仔細,避免和排除各種要素的影響,使之得到準確可靠的查驗成果。
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