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技術文章

ELISA試劑盒的代測主要有哪幾種方法?

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  ELISA試劑盒運用的基本原理就是將抗原抗體固定到特定的載體上進行反應,并通過酶催化底物發生化學變化,將抗原抗體反應通過顏色的辦法顯現出來。固相吸附蛋白對錯特異性的,在包被目的免疫蛋白后,未吸附蛋白的固相表面依然有吸附其它蛋白的才華,為了確??乖贵w反應的特異性,因而被剩余的固相表面應該用抗原抗體反應無關蛋白封閉,也可用脫脂奶粉、明膠、牛血清代替。酶可以通過共價鍵與抗原或抗體銜接構成結合物,當抗原抗體反應的時分,被檢測靶方針中也結合了酶分子。
 
  ELISA試劑盒的代測方法:
 
  一、間接法:此測定辦法與直接法相似,不一樣在于級抗體沒有酶符號,改用酶符號的二級抗體去辨識一抗體來測定抗原量。
 
  優勢:二抗能夠加強信號,并且有多種挑選能做不一樣的測定剖析,不加酶符號的一抗體則能保存它zui多的免疫反響性。
 
  缺陷:交互反響發作的機率較高。
 
  二、直接法:將抗原直接固定在固相載體上,參加酶符號的一抗體,即可測定抗原總量,此一抗體的特異性非常重要。
 
  優勢:操作手續簡略,因無須運用二抗可防止交互反響。
 
  缺陷:實驗中的一抗都得用酶符號,但不是每種抗體都適合做符號,費用相對進步。
 
  三、雙抗體夾心法
 
  優勢:高活路,高專一性,抗原無須事前純化。
 
  缺陷:抗原必定得具有兩個以上的抗體部位。
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