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技術文章

Insphero3D懸滴板:研究腫瘤與間質細胞的相互作用

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文章標題:

Development of an Innovative 3D Cell Culture System to Study Tumour - Stroma Interactions in Non-Small Cell Lung Cancer Cells

采用創新的三維細胞培養系統,研究非小細胞肺癌細胞與間質細胞的相互作用

 

介紹:使用新穎的三維(3D)共培養模型----Insphero AG研發的GravityPLUS 3D懸滴培養系統(GravityPLUS 3D cell culture platform), 研究非小細胞肺癌(NSCLC) 細胞系和肺成纖維細胞的共培養。使用GravityPLUS 3D懸滴培養系統可以研究腫瘤-間質間的相互作用,是更接近于體內的細胞培養模型。

 

方法:使用多孔懸滴微量培養板(GravityPLUS 3D cell culture platform),研究單細胞的3D培養和多細胞的3D共培養。在懸滴培養板中,研究NSCLC細胞系之 A549細胞的單獨培養、NSCLC細胞系之 Colo699細胞的單獨培養、A549與肺成纖維細胞的共培養、和Colo699與肺成纖維細胞的共培養。腫瘤微球體形成并穩定后(培養5天和10天后),使用Annexin V/Propidium Iodide(膜聯蛋白V/碘化丙啶)對微球體染色并用流式觀測;腫瘤成纖維細胞微球體形成后用電鏡(SEM)、熒光顯微鏡、半薄切片和免疫組化(IHC)觀測;除了這些常規組織學檢測,還用免疫組化的方法檢測鈣粘素、波形蛋白、腫瘤增殖抗原Ki67、纖連蛋白、角蛋白7和平滑肌肌動蛋白(a-SMA)的表達量。

 

結果:A549單細胞微球體與A549與成纖維細胞培養共培養的微球體相比,生存能力要差一些;而Colo699微球體的生存能力要比Colo699共培養的強。 ki67的表達量在單細胞培養和共培養也存在很大的差異。波形蛋白表達量的增加和鈣粘素表達量的減少都能被監測到,表明三維培養過程中存在間質表型的轉變。除此之外,只有成纖維細胞系與A549細胞系共培養的時候,才有表達a-SMA,從而表明一種間質狀態向另一種間質狀態轉換。

 

結論:證明GravityPLUS 3D懸滴培養系統(GravityPLUS 3D cell culture platform)是研究腫瘤微球體共培養的很有利的工具。而且,這些微球體可以進一步探討腫瘤與間充質間的相互作用,可以更好的反映出腫瘤細胞在體內微環境的狀態。Insphero開發的GravityPLUS 3D懸滴培養系統將會為研發抗癌劑及尋找生物標記物做出一些貢獻。

 

Insphero 3D懸滴培養板產品介紹:http://www.mujiutonghuapen.com/qxky001-Brand-24075/

文章下載地址:http://www.mujiutonghuapen.com/qxky001-Down-155198/

 

 

 

 

 

 

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